Micotoxinas. 6 

Micotoxinas em plantas forrageiras.  

As gramíneas são amplamente utilizadas pelo homem como fontes de alimentos, seja na produção de cereais (trigo, milho, sorgo, arroz, cevada, centeio, aveia, etc), seja como forrageiras empregadas na alimentação de animais (alfafa, azevém festuca, brachiaria, colonião, elefante, etc). Na alimentação animal, as gramíneas e outras plantas forrageiras, podem ser  aproveitadas de várias maneiras: 

a) como pastagens verdes; 

b) como palhas secas, quando as plantas são deixadas no campo após a colheita dos cereais e fornecidas aos animais; 

c) na forma de feno;

d) como silagens;

e) na forma de concentrados, quando cereais ou subprodutos da agroindústria são utilizados na formulação  de rações.

Se considerarmos que em cada uma das situações indicadas acima, o ecossistema irá se apresentar de forma bem diversa, entenderemos que em cada caso, poderá haver fungos diferentes e, consequentemente, micotoxinas também diferentes. 

a) Fungos patogênicos para plantas. 

Há inúmeras espécies de fungos capazes de causar doenças em plantas. Algumas delas, ao invadirem os tecidos vegetais, seja ele de natureza vegetativa ou reprodutiva, podem produzir substâncias tóxicas para os animais e o homem. Gramíneas que são utilizadas habitualmente como forrageiras  ou as que são usadas na produção de cereais como o arroz, trigo, cevada, centeio, aveia, estão sujeitas à infecções causadas por fungos em sua fase de crescimento no campo. Durante o desenvolvimento desses fungos na planta, algumas espécies produzem micotoxinas que podem permanecer ativas mesmo após a planta ter se transformado em palha ou ter sido cortada e submetida à secagem para a produção de feno ou para ser transformada em silagem. 

Dentre os fungos mais conhecidos como agentes de doenças em plantas e que também são produtores de micotoxinas enquanto as plantas ainda estão vivas e crescendo nas lavouras ou nas pastagens, destacam-se espécies dos gêneros Fusarium, Alternaria, Rhizoctonia, Stenocarpella (Diplodia). Dentre as muitas substâncias tóxicas produzidas nestas circunstâncias, podemos destacar algumas das principais micotoxinas elaboradas por espécies dos gêneros: 

Fusarium -  Nivalenol (NIV), Deoxinivalenol (DON), Zearalenona, T2, HT2 e a Fumonisina; 

Alternaria - um gênero relativamente pouco estudado pelos micotoxicologistas, que, nos últimos anos tem sido associado com a produção de diversas micotoxinas potencialmente importantes para a criação de animais como o Alternariol, o Alternariol mono metil éster, o Altenanueno e o Ácido Tenuazônico; 

Rhizoctonia leguminicola - fungo que produz a Slaframina; 

Stenocarpella (Diplodia) maydis - fungo patogênico para o milho e que é produtor de Diplodiatoxina.

1. Slaframina

• Slaframina é uma micotoxina produzida pelo fungo Rhizoctonia leguminicola classificada no grupo químico dos alcalóides que possuem o anel indol em sua estrutura molecular (alcalóide indolizidínico). É o agente da Sialorréia micotóxica que tem sido observada em equinos, bovinos, ovinos e caprinos mantidos em pastagens de trevo: trevo vermelho (Trifolium pratense) e trevo branco (Trifolium repens) ou que recebem suplementação de feno de alfafa contaminada pelo fungo.

• Sinais clínicos - Os sinais surgem logo após a ingestão da forragem contaminada (1 a 3 horas) e , com a retirada do alimento contaminado, começam a diminuir após 48 a 72 horas. 
• Por causa da ação parassimpaticomimética da micotoxina, que imita a ação da acetilcolina, ao se ligar aos seus receptores, os sinais clínicos mais frequentemente observados são: 
• a) salivação excessiva;
• b) lacrimejamento moderado;
• c) micção frequente, cólicas e diarréia;
• d) se o consumo de alimento contaminado persistir, pode-se observar perda de peso, redução da lactação e timpanismo.
• Epidemiologia - Ao infectar as folhas da planta formando manchas negras em forma de anéis, o fungo Rhizoctonia leguminicola se desenvolve formando hifas escuras que vão se estendendo e invadindo toda a folha, culminando com a morte da planta. A partir do centro surgem órgãos de frutificação, esclerócios pretos que ao caírem no solo permitem que o fungo permaneça viável e persista nos solos de áreas infectadas de um ano para outro. Enquanto o fungo cresce e metaboliza os componentes químicos da planta, ele produz e libera a micotoxina Slaframina que pode estar presente tanto nas pastagens como  também em feno seco armazenado. 
• No feno armazenado, a Slaframina pode se manter ativa por 10 meses ou mais, sua concentração pode diminuir, mas sua atividade biológica pode permanecer a mesma. Se, por exemplo, o feno contiver o equivalente a 100 ppm de slaframina, após 10 meses, mesmo que sua concentração tenha se reduzido para cerca de 10 ppm, ela continuará produzindo seus efeitos.  

• Tratamento - Não há tratamento específico para a intoxicação e nem é necessário porque o animal retorna à normalidade com a retirada da forragem contaminada. Pode-se fazer tratamento sintomático com atropina para reduzir a salivação e a diarréia. 

  

  2. Diplodiatoxicose

A diplodiose foi descrita pela primeira vez na África (África do Sul,  Rodésia e Zâmbia) e, no Brasil, ela foi observada inicialmente no  Rio Grande do Sul, em bovinos alimentados com palha de milho deixadas no campo após a colheita. A intoxicação é mais frequênte no inverno e em épocas de maior precipitação pluviométrica quando bovinos e ovinos se alimentam de palhas secas de milho onde ainda restam espigas contendo grãos colonizados por Stenocarpella (Diplodia) maydis.  Esse fungo é um patógeno do milho que invade o caule, a folha e as sementes da planta em desenvolvimento no campo. A infecção dos grãos se inicia pela base da espiga com a produção de um micélio de cor cinza ou marrom-claro. Durante o seu crescimento, o fungo produz picnídios negros que são órgãos de frutificação produzidos na espiga de milho. Ao caírem no solo, os picnídios permanecem viáveis durante o inverno e a primavera, até que uma  nova lavoura de milho é formada. Os esporos que são liberados dos picnídios são transportadas pelo ar ou por insetos indo infectar o milho durante o seu crescimento. Após a colheita, e durante o inverno, quando quando há pouca disponibilidade de forragens os animais costumam ser colocados para se alimentarem da palha seca que restou no campo após a colheita do milho ocorrendo, então, os episódios de intoxicação.

O princípio ativo é um metabólito tóxico denominado  diplodiotoxina que foi isolado e caracterizado a partir de culturas de Stenocarpella (Diplodia) maydis. Somente o picnídio do fungo é tóxico, sendo necessário cultivar o fungo por 6-8 semanas para reproduzir experimentalmente a doença. 

Sinais clínicos - A morbidade é variável entre 25% e 80% e a mortalidade entre 10% e 20%. Os sinais clínicos caracterizam-se por: 

a)  tremores musculares generalizados; 

b) incoordenação, quando os animais caminham de forma característica levantando exageradamente os membros; 

c) ataxia, paralisia e dismetria; 

d) quando os animais são movimentados os sinais clínicos se agravam, podendo haver quedas. Alguns animais permanecem em decúbito lateral ou esternal permanente e morrem; 

e) a maioria dos animais recupera-se em 10 a 12 dias após serem afastados do material contaminado. 

Lesões - Não se observam lesões macroscópicas, mas na histopatologia observa-se de moderada a severa degeneração na mielina da matéria branca do cerebelo. 

Diagnóstico - O diagnóstico se baseia na observação dos sinais clínicos e na observação de picnídeos de Stenocarpella (Diplodia) maydis na palha e espigas do milho que permanecem no campo.

Controle - A única forma de controlar a intoxicação é promover o imediato afastamento dos animais dos locais onde exista palha contaminada. A recuperação ocorrerá em poucos dias.

• b) Fungos decompositores
• de matéria vegetal. 

Em gramíneas, as folhas localizadas na base da planta são as mais velhas e já se encontram em decomposição pela ação de diversos fungos saprófitas. Entre os fungos que participam do processo de reciclagem dessa matéria orgânica vegetal, destaca-se  o Pithomyces chartarum que é fungo produtor de esporidesmina, uma micotoxina que, por ser hepatotóxica, é um dos causadores da fotossensibilização micotóxica em animais. 

Pithomyces chartarum - Esporidesmina

Fotossensibilização micotóxica - Em países como a Austrália e a Nova Zelândia, a fotossensibilização causada pela esporidesmina vem ocupando, há alguns anos, um lugar de destaque entre as patologias de interesse econômico para a criação de animais de produção. Esta micotoxina é produzida pelo Pithomyces chartarum, um fungo que não sendo patogênico para as gramíneas, cresce somente nas folhas mortas da planta que se encontram em contato com o solo. Portanto, é um fungo que atua na decomposição da matéria orgânica vegetal contribuindo para a sua reciclagem. Entretanto, a   o crescer nestas folhas, durante o seu ciclo reprodutivo assexuado, com produção de conídios, também ocorre a biossíntese daesporidesmina. Para que esta micotoxina seja sintetizada pelo Pithomyces chartarum em gramíneas, é necessária a conjugação de pelo menos três fatores: temperatura entre 20 e 28^o C, radiação solar (ultravioleta = sol) e umidade elevada.

  Fig. 1. Pastagem de Brachiaria decumbens com folhas secas em decomposição.

     Fig. 2. Conídeos de P. chartarum, em forma de granada, septados nos sentidos longitudinal e transversal.

 Tabela. 1. Efeito da temperatura sobre a esporulação  

        do P. chartarum

Temperatura (oC)	Peso seco	Conídeos/mL
20	3,5 mg/mL	209 x 10 4
24	4,1 mg/mL	218 x 10 4
28	3,7 mg/mL	194 x 10 4

No Brasil, este tipo de fotossensibilização tem sido observado com maior frequência em bovinos e ovinos mantidos em pastagens de Brachiaria decumbens. Entretanto, a participação da esporidesmina  nestes casos, tem sido colocada em dúvida  por pesquisadores que  verificaram que a maioria das culturas de P. chartarum obtidas destas pastagens não produziram a micotoxina. A prudência sugere que estudos complementares sejam realizados com maior número de cepas do fungo originadas de diferentes regiões do pais, comparadas com cepas comprovadamente produtoras de esporidesmina.

Fig. 3.  Animais intoxicados pela ingestão de pastagens contendo esporidesmina com lesões semelhantes a queimadura.

A esporidesmina é basicamente uma micotoxina hepatotóxica e, para que surjam os sintomas característicos de fotossensibilização, é necessário que as lesões produzidas pela micotoxina evoluam para a obliteração dos dutos biliares, impedindo que a bile seja eliminada no intestino. Nos animais normais, junto com a bile, também é eliminada a filoeritrina que é um produto oriundo do desdobramento da clorofila e que possui atividade fotossensibilizadora. Não sendo eliminada junto com a bile, a filoeritrina cairá na corrente circulatória provocando a fotossensibilização.

Fig. 4. Resumo esquemático do mecanismo de desenvolvimento da fotossensibilização micotóxica em ruminantes.

 Por ser uma micotoxina hepatotóxica, mesmo que não ocorra a fotossensibilização, é evidente que as lesões provocadas pela micotoxina já serão suficientes para causar prejuízos à fisiologia do animal, com reflexos em seu desenvolvimento corporal ou na produção de leite.

No controle da fotossensibilização micotóxica vários procedimentos foram experimentados, alguns resultaram em processos viáveis, outros se mostraram caros em demasia e outros, ainda, não foram conclusivos. Dentre eles podemos citar:

• Acompanhamento e análise das condições climáticas procurando identificar a confluência dos fatores climáticos que podem estimular a esporulação. Quando ficar evidente que os três principais fatores irão coincidir em um mesmo período, os animais deverão ser afastados da pastagem de B. decumbens.

• Como já foi devidamente demonstrado há uma correlação positiva entre o processo de esporulação do P. chartarum e a produção de esporidesmina deixando a pastagem tóxica para os animais. A fotossensibilização poderá se desenvolver quando em uma pastagem houver uma concentração superior a 200 000 conídeos de P. chartarum por grama de folhas secas de B. decumbens. A contagem de esporos, se conduzida adequadamente, poderá ser uma boa maneira de controlar a qualidade da pastagem, determinando os períodos em que ela não deverá ser utilizada.

• A aplicação de fungicidas nas pastagens por meio de aviões agrícolas foi uma das propostas experimentadas na Austrália e Nova Zelândia, com resultados considerados positivos, se analisados somente pelo lado microbiológico. A aplicação de tiabendazole resultou em considerável redução no número de conídeos do fungo, mas os custos eram muito elevados, inviabilizando a utilização do método.

• P. chartarum é um fungo que vive no solo e se desenvolve nas folhas velhas da planta, que estão mortas e se encontram junto ao solo. Ele é um daqueles fungos que participam do processo de reciclagem da matéria orgânica presente neste material vegetal. O sistema de rotação de pastagens é uma boa maneira de evitar que os animais comam a parte inferior da planta que contém o fungo e sua toxina. A mudança periódica de pastagem um pouco antes de o animal ter acesso às folhas mortas irá, além de impedir de maneira eficiente, que o animal se intoxique, introduzir uma boa prática de manejo, com evidentes resultados no desenvolvimento animal.

• Experimentos com dietas ricas em proteínas demonstraram que é possível reduzir os efeitos hepatotóxicos da esporidesmina diminuindo, inclusive, os índices de mortalidade nos animais de experimentação.

• O desenvolvimento de uma vacina foi tentado, sem sucesso. Como as outras micotoxinas, a esporidesmina não tem propriedades imunogênicas porque elas são haptênicas. Para se tornarem imunogênicas, as micotoxinas necessitam que uma molécula de proteína seja conjugada a ela. Como acontece com outras micotoxinas, esta conjugação é possível, mas os anticorpos obtidos após inoculações em animais, não são protetores contra as intoxicações. Eles não protegem contra as intoxicações, mas são capazes de reagirem com as micotoxinas específicas in vitro. Isto tornou possível o seu emprego em kits imunológicos para a detecção de micotoxinas em alimentos ou em tecidos de animais.

• O tratamento dos animais intoxicados é sintomático e inclui o afastamento deles da ação direta da luz solar, o uso de medicamentos protetores hepáticos e o tratamento local das áreas afetadas, para prevenir infecções bacterianas.  

c) Micotoxinas em palhas secas.

Plantas secas são comumente utilizadas na criação de animais como alimentos volumosos para a alimentação de bovinos, equinos, caprinos ou ovinos ou para serem usadas na forma de cama para cobrir o piso de ambientes em que os animais são mantidos estabulados ou confinados. Elas podem ser fornecidas como: 

a) Palhas secas - que são abandonadas no campo após a colheita de uma das várias gramíneas usadas na produção de grãos, como o milho, arroz, trigo, cevada, centeio, etc.. Palhas secas dessas plantas, que são deixadas no campo após a colheita, costumam ser utilizadas na alimentação de bovinos, equinos e de outros herbívoros que são colocados para pastarem sobre essas sobras de lavouras. Como é natural no processo de reciclagem da matéria orgânica vegetal, a exposição das partes já mortas da planta, possibilitará o desenvolvimento de diversos fungos decompositores e, dentre eles, poderão surgir espécies micotoxigênicas.  

É importante salientar que, durante o ciclo de desenvolvimento da planta, ela poderá se tornar infectada por fungos diferentes daqueles que participam da reciclagem da matéria morta. Dessa maneira, poderá haver micotoxinas na  palha, que foram produzidas enquanto a planta ainda estava viva (toxinas do Fusarium, por exemplo)  e  outras  que somente serão produzidas quando elas já estiverem mortas e em decomposição.

b) Cama - Este tipo de material também é bastante utilizado como cama em estábulos, pocilgas e outros ambientes usados para o abrigo de animais. O principal objetivo para se cobrir o piso com capim seco (cama) é a redução da umidade ambiental através da absorção de água pela palha seca. Por absorver água do ambiente a palha se torna úmida e, por isso, se transforma em um substrato adequado ao crescimento de diversos fungos que, ao metabolizarem a matéria orgânica vegetal, poderão liberar metabólitos secundários tóxicos. 

ESTAQUIBOTRIOTOXICOSE

Estaquibotriotoxicose é uma micotoxicose que se manifesta especialmente em equinos (mais sensíveis), bovinos, ovinos e suínos que consomem palhas ou fenos obtidos de plantas onde tenha ocorrido crescimento do  fungo Stachybotris atra. 

Micotoxinas - Stachybotris atra é um fungo capaz de produzir diversas micotoxinas do grupo dos Tricotecenos macrocíclicos, destacando-se entre elas  as Satratoxinas F, G e H, os Tricoverróis A e B, as Trocoverrinas, as Verrucarinas B e J, a Roridina E, as Atranonas e  a Estaquilisina (uma hemolisina). Não se sabe, ainda, quais destas micotoxinas ou se todas elas podem estar correlacionadas com o quadro de intoxicação. As mais estudadas têm sido as Roridinas, Verrucarinas, Satratoxinas e as Bacarinas .

É importante salientar que tanto as Roridinas quanto as Verrucarinas também podem ser produzidas no solo por Myrothecium roridium e  M. verrucaria e absorvidas através das raizes pela planta Baccharis coridifolia que é uma conhecida planta tóxica. 

Efeitos tóxicos - À necrópsia observa-se lesões necróticas e hemorrágicas em diversos órgãos. 

O principal mecanismo de ação dos tricotecenos macrocíclicos está associado à potente ação inibidora que exercem sobre a biossíntese de proteínas em células eucarióticas, afetando principalmente a divisão celular. São também dotadas de propriedades leucotóxicas e dermonecróticas e são inibidoras de sistemas enzimáticos, além de serem imunotóxicas. 

Sinais clínicos - A Estaquibotriotoxicose pode se manifestar de duas formas distintas: 

a) Aguda com gastroenterite hemorrágica ou

b) Crônica com leucopenia.

Observa-se, inicialmente, lesões necróticas localizadas na boca, seguindo-se um quadro de leucopenia e coagulopatia, culminando com óbito. Os animais também podem apresentar intensa irritação na pele e nas membranas mucosas. 

Epidemiologia - Há evidências de que a intoxicação possa ser desencadeada não somente pela ingestão das micotoxinas presentes na planta contaminada pelo fungo, como também através da inalação de conídios e fragmentos de hifas que carreariam as micotoxinas. Esta possibilidade se reveste de grande importância porque, além dos animais, também o homem estaria sujeito á contaminação através da inalação de poeira emitida pela movimentação dos estoques de palha ou de feno.

d) Micotoxinas em fenos e silagens.

Fenos

Durante o processo de fenação, quando as forragens depois de cortadas são submetidas à secagem por exposição ao sol, os fungos  que são patogênicos para as plantas, entre eles, Fusarium, Cladosporium e Alternaria, morrem e são substituídos por espécies de outros gêneros que, também, poderão ser toxigênicas.  Em geral, as espécies que se desenvolvem nesta segunda etapa, pertencem aos gêneros Aspergillus e Penicillium, com predomínio de um ou de outro, de acordo com o tipo de substrato e com as condições ecológicas do ambiente de estocagem. Isto quer dizer que só haverá crescimento de fungos no feno estocado se ele vier a ser mantido em ambientes que possibilitem o aumento de sua atividade de água (Aa). 

As micotoxinas que forem produzidas na planta ainda verde, antes de ser cortada e fenada, podem continuar ativas mesmo após a planta ter sido seca e transformada em feno. Por esse motivo, algumas micotoxinas como a zearalenona e o deoxinivalenol, podem ser encontradas em fenos, mesmo que não se tenha sucesso nas tentativas de cultivar o Fusarium. Às micotoxinas pré-existentes, serão incorporadas outras que vierem a ser produzidas por espécies dos gêneros Aspergillus e Penicillium.  

Análises micológicas realizadas em amostras de feno demonstraram a presença, em elevados percentuais, de Aspergillus fumigatus, Aspergillus nidulans, Aspergillus versicolor e de espécies do grupo Aspergillus glaucus.  Em outro estudo, verificou-se que os gêneros Fusarium, Cladosporium, Alternaria e Acremoniella, presentes logo após a colheita, foram substituidos por espécies dos gêneros Aspergillus (A. flavus, A. glaucus, A. candidus, A. niger) e Penicillium).    

Aspergillus fumigatus

Dentre os fungos contaminantes de feno, o Aspergillus fumigatus pode ser considerado como um dos mais importantes. Além de ser um contaminante  frequente, ele é um dos principais agentes de infecções fúngicas em animais domésticos e no homem. A Aspergilose tem sido diagnosticada em bovinos, equinos, ovinos, suínos, cães, coelhos e em animais silvestres. A localização pulmonar é a mais comum, mas também podem ocorrer infecções generalizadas, incluindo o comprometimento da mucosa intestinal e de nódulos mesentéricos. As lesões são granulomatosas e caracterizadas pelo desenvolvimento do fungo em uma colônia envolvida pela reação tecidual do organismo animal. 

As infecções no aparelho respiratório são mais frequentes em animais que são estabulados e permanecem por longos períodos em contatos com materiais de origem vegetal (feno, ração ou cama de palha) que podem mofar se estiverem com elevado grau de umidade. Os animais inalam os conídios produzidos pelo fungo iniciando o processo infeccioso.

Em bovinos pode ocorrer tosse fraca com respiração dificultosa, diarréia sanguinolenta e fétida, febre baixa e perda de apetite. Podem ser observadas lesões pulmonares caracterizadas por nódulos na cavidade sub-pleural  e enfisema interlobular. A infecção pode se tornar generalizada e também pode ocorrer aborto, quando o fungo alcança o útero através da circulação sanguínea.

Em equinos, também o aborto pode ser observado secundando uma infecção pulmonar. Também pode ocorrer meningite e infecção generalizada. É bastante frequente a infecção da bolsa gutural por Aspergillus.  A. fumigatus também pode ser responsável por mastites em vacas e cabras.

 Silagens 

Ensilagem é um sistema de preservação de forragens verdes mantidas em silos sob baixa tensão de oxigênio (anaerobiose) e alto grau de acidez resultante de fermentações bacterianas. No preparo das silagens são empregados vegetais que não contêm sementes maduras, mas somente um misto de plantas com seus caules e folhas ou, até mesmo sementes ainda imaturas. Toda a matéria verde é cortada em pequenos pedaços e transferida para o silo onde deve ser bem prensada para a eliminação do oxigênio. Para acelerar o processo fermentativo, podem ser utilizados inoculantes bacterianos que sejam produtores de ácido propiônico e ácido lático. Silagens inoculadas com uma associação de Propionibacterium acidipropionici e Lactobacillus plantarum apresentam menor crescimento de fungos e leveduras após a abertura do silo. Depois de cheio, o silo precisa ser bem vedado com uma cobertura de plástico para evitar a penetração de oxigênio do ar. Em condições de anaerobiose e pH ácido, a maioria dos fungos fica impedida de crescer, mas se o processo de preparação for mal conduzido quando podem ocorrer defeitos na vedação ou na compactação e, se durante o seu uso, o material permanecer exposto ao ar por longos períodos, diversos fungos filamentosos poderão crescer e produzir micotoxinas. As micotoxinas detectadas em silagens são produzidas por fungos diferentes em dois momentos distintos, antes ou após o processo de ensilagem.

1. Antes da ensilagem (antes da colheita) - Micotoxinas podem ser produzidas em vegetais mesmo antes de serem colhidos para o preparo de silagens. Aspergillus flavus, e espécies do gênero Fusarium, por exemplo, dependendo da interação de certos fatores, podem produzir suas micotoxinas na planta ainda durante o cultivo. O mesmo acontece em relação aos fungos endofiticos, muitos dos quais podem produzir alcalóides tóxicos.

Quando a anaerobiose e a acidez são estabelecidas na silagem, esses fungos de campo têm o seu crescimento interrompido, mas suas micotoxinas, se presentes, permanecerão ativas. Dessa maneira, micotoxinas como a Zearalenona, os Tricotecenos e a Fumonisinas, devem ser consideradas como micotoxinas que seriam produzidas no período anterior à ensilagem ou quando a silagem não tiver sido adequadamente preparada e as espécies de Fusarium puderem continuar a crescer no material ensilado. Mesmo que este princípio possa ser aplicado às Aflatoxinas porque, como se sabe, o A. flavus também pode afetar o milho ainda no campo, apesar de poucas vezes isto acontecer, as Aflatoxinas não devem ser consideradas contaminantes importantes de silagens. Elas devem ser consideradas a principal das micotoxinas que são produzidas em grãos armazenados. 

2. Após a ensilagem (pós-colheita) - Com a modificação do meio ambiente no interior das silagens, outras espécies que são adaptadas às condições de microaerofilia e alta acidez, podem se desenvolver e produzir suas micotoxinas. Se durante o processo de ensilagem, a compactação da massa vegetal não tiver sido feita corretamente, resultando em bolsões de ar ou, se a vedação externa for deficiente permitindo a entrada de ar,  fungos trazidos do campo, como o Fusarium, poderão manter-se ativos e produzindo suas toxinas. 

Dentre os diversos fungos isolados de silagens, os mais importantes são: Penicillium roquefortii Aspergillus fumigatus, Aspergillus clavatus, Byssochlamys nívea, Monascus spp. Estas espécies são de importância na criação de animais por serem produtoras de micotoxinas que interferem com diversos aspéctos da saúde animal. Dentre as micotoxinas que podem ser produzidas por estes fungos destacam-se: 

Penicillium roquefortii: Patulina, Roquefortinas B, C, e D, Ácido micofenólico, Ácido penicílico, Toxina PR, Festuclavina, Agroclavie, Fumigaclavinas A e B, Marcofortinas A, B e C.

Aspergillus fumigatus:  Toxinas tremorgênicas (Verruculogeno, Fumitremorgeno e Penitren A), Gliotoxina, Fumagilina, Viriditoxina.

Aspergillus clavatus: Patulina, Citochalasina, Triptoquivalina.

Byssochlamys nívea: Patulina

Monascus spp: Monacolinas e Citrinina.

Micologia 3

Fungo mata milhões de morcegos e compromete a produção de alimentos.

Milhões e milhões de morcegos estão morrendo anualmente nos Estados Unidos. Desde o ano de 2006, quando foi descoberta a Síndrome do Nariz Branco ("WNS - White Nose Syndrome"), já teriam morrido cerca de 7 milhões de morcegos que habitam cavernas nas regiões mais frias do país.  Trata-se de uma epidemia causada por um fungo psicrófilo (cresce melhor em ambientes frios) classificado como Geomyces destructans. 

  Geomyces destructans também tem sido encontrado infectando morcegos em diversos países europeus, mas sem apresentar a gravidade observada nos Estados Unidos. Por  não ser letal, a infecção pode estar associada a uma cepa pouco virulenta do fungo.

 Morcegos afetados 

Nos Estados Unidos, o Geomyces destructans já foi encontrado infectando seis diferentes espécies de morcegos:

1) Myotis lucifugus - pequeno morcego marrom (algumas vezes chamado de  pequeno myotis marrom);

2) Myotis septentrionalis - myotis do Norte de orelhas compridas; 3) Eptesicus fuscus - grande morcego marrom; 

4) Perimyotis subflavus - morcego tricolor; 

5) Myotis leibii - myotis oriental de pé pequeno; 

6) Myotis sodalis - morcego indiano. 

Cultivo do fungo em laboratório  

O melhor crescimento do Geomyces destructans nos meios de cultura artificiais ocorre quando os cultivos são incubados preferencialmente a 15°C. Por serem psicrófilos, ele pode crescer entre 4°C e 15°C, faixa de temperaturas correspondente às observadas no microclima das cavernas onde ocorre a hibernação dos morcegos. Nenhum crescimento foi observado em temperaturas negativas ou acima de 25°C. Os meios de cultura mais utilizados para cultivar o fungo são o "agar batata dextrose" e o Sabouraud dextrose agar. Nestes meios, o crescimento do fungo, além de ser lento, é bem pequeno. 

Hipóteses

Geomyces destructans é um fungo que se desenvolve melhor em baixas temperaturas (fungo psicrófilo) e em ambientes muito úmidos, características que são típicas das cavernas onde tem ocorrido a  micose. Por isto, não foi nenhuma surpresa para os micologistas que a incidência da doença tenha sido maior nas cavernas mais úmidas e que apresentavam temperaturas entre 2 e 15 graus Celsius. Durante os períodos de hibernação, os morcegos reduzem sua temperatura corporal, aproximando-a da temperatura do meio ambiente e sua frequência cardíaca passa de 1000 bpm para cerca de 4 bpm. Desta maneira, o fungo não terá qualquer impedimento para invadir a superfície de seu corpo, infectando sua pele e as asas. Ao crescer na pele, nas asas e nas orelhas de morcegos, o Geomyces destructans penetra através do folículos pilosos e das glândulas cebáceas provocando o surgimento de pequenas úlceras  na pele. Posteriormente, ele emerge na superfície da pele produzindo estruturas aéreas constituidas de hifas e pequenos conídios curvados, com a forma de feijões, na extremidade de conidióforos. 

O desenvolvimento do fungo ao redor do nariz e sua penetração na pele poderia provocar um efeito irritante local, trazendo desconforto ao animal. Durante o inverno, os morcegos costumam hibernar, despertando por pequenos períodos a cada quinze dias, aproximadamente. Com o efeito irritante no local da lesão fúngica, os animais hibernam por períodos mais curtos, obrigando seu organismo a usar as reservas energéticas acumuladas na forma de gordura. Despertos, eles saem para caçar insetos que, durante o inverno, quase não existem. Não encontrando alimento para repor as energias perdidas, eles ficam cada vez mais enfraquecidos e não conseguem suportar os rigores do inverno, morrendo de frio e fome. 

Little brown bats com a sindrome do nariz branco.

Credit: Photo courtesy Nancy Heaslip, New York Department of Environmental Conservation

Little brown bat com a sindrome do nariz branco

Credit: Photo courtesy Al Hicks, New York Department of Environmental Conservation

Little brown bat; Fungo na membrana da asa.

Credit: Photo courtesy Ryan von Linden/New York Department of Environmental Conservation

Little brown bat com a sindrome do nariz branco

Credit: Photo courtesy Ryan von Linden/New York Department of Environmental Conservation.

Little brown bat com a síndrome do nariz branco. Credit: Marvin Moriarty/USFWS.

Colônia de morcegos com a síndrome do nariz branco.                                                                              Credit: Wil Orndorff, Virginia Department of Conservation and Recreation - Division of Natural Heritage

                          Sinais da infecção fúngica na orelha.
 Credit: Photo courtesy Greg Turner, Pennsylvania Game Commission.

Little brown bat com a síndrome do nariz branco. Credit: Marvin Moriarty/USFWS.

Será tão simples assim?

Por que será, então, que isto não acontecia antes? Por que a doença só foi descoberta em 2006?

Afinal de contas, os morcegos agem da mesma forma desde que eles existem e, quanto tempo faz isso? Milhares de anos? Ou milhões? Eles sempre hibernaram e eles sempre modificaram sua fisiologia durante o inverno e sempre ficaram com seu corpo mais frio e com o coração mais lento durante o inverno. 

E o Geomyces destructans, não existia até então? Não creio que ele tenha surgido assim do nada, ele sempre existiu, é claro, como os morcegos também sempre existiram. E vivendo juntos, no mesmo lugar e nas mesmas condições ambientais de hoje. Se os morcegos não mudaram e se o fungo também é o mesmo,

 o que teria mudado, então?

Se o Geomyces destructans de fato é um fungo oportunista, como se acredita, alguma coisa, então, deve ter mudado em seu hospedeiro, o morcego. 

Será que os morcegos não puderam se preparar adequadamente para suportarem o inverno, quando seu organismo necessita armazenar gordura para ser usada durante a hibernação?  Pode ser, que nos dias atuais, quando se faz extensivas aplicações de inseticidas nas lavouras, haja menor disponibilidade de alimentos (insetos). Não conseguindo obter alimento em quantidade suficiente, sua massa corporal e, em especial, a camada de gordura extra, não atinge o nível ideal antes do período de hibernação e, desta maneira, seu organismo pode ter se tornado mais suscetível ao ataque do fungo.  

E os inseticidas não poderiam ser, eles mesmos, tóxicos para os morcegos? Neste caso, a culpa não poderia ser dos inseticidas em si? Quem saberia dizer se um desses inseticidas que atualmente são aplicados nas lavouras não teria atividade imunossupressora?  Neste caso, os morcegos intoxicados e tornados imunodeprimidos tornar-se-iam susceptíveis ao  desenvolvimento de um fungo oportunista como o Geomyces destructans. 

Implicações previsíveis

Como os morcegos insetívoros se alimentam de grandes quantidades de insetos, se houver uma drástica redução em suas colônias ocorrerá, de imediato, um considerável aumento na população de insetos no meio ambiente. Por causa da maior presença de insetos, as lavouras  serão  menos produtivas e haverá maiores riscos à saúde humana e animal, pois numerosas doenças infecciosas têm nos insetos os seus vetores de transmissão e disseminação. 

Para conseguir manter os atuais níveis de produtividade nas lavouras  e reduzir os riscos de ocorrência de doenças infecciosas e parasitárias  que são transmitidas ao homem e aos animais através de insetos, o homem terá de fazer aplicações cada vez maiores de inseticidas químicos para conseguir controlar a população crescente de insetos. Isto  poderá provocar um desastre ambiental de proporções inimagináveis em função do aumento da contaminação dos solos e, principalmente das águas dos rios e mares. Com mais inseticidas no meio ambiente, aves, batráquios e toda espécie de animais que se alimentam de insetos ou de sementes poderão morrer intoxicados., acelerando o processo de extinção de algumas das  espécies mais sensíveis.  

Referências

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MICOTOXINAS. 5

Efeitos das micotoxinas sobre ruminantes (continuação)

Diagnóstico de micotoxicoses em ruminantes

Quando se compara as alterações clínicas e patológicas observados em intoxicações naturais com os resultados obtidos em intoxicações experimentais, verifica-se que nem sempre eles se equivalem. Quando se  aplica a metodologia científica em um processo investigativo, é necessário que as condições experimentais excluam toda e qualquer possível fonte de interferência nos resultados. Isto não acontece no ambiente natural. Em condições naturais, como se sabe, as coisas costumam ser diferentes porque outros fatores podem atuar, ao mesmo tempo, junto com a micotoxina. Isto significa dizer que os efeitos exercidos por uma certa micotoxina pode variar em função da co-existência de outros fatores que poderão interagir com ela.  Por esses motivos, o diagnóstico das micotoxicoses em ruminantes ou em outra espécie animal, nunca é tão simples de ser realizado, ele é sempre poderá ser complicado por uma ou outra razão:

1. o tempo de exposição à micotoxina nem sempre se repete quando em condições naturais;

2. é comum encontrar mais de uma micotoxina, ao mesmo tempo, num determinado alimento;

3. o grau de toxidez das micotoxinas depende, não somente de sua concentração nos alimentos mas, também, de sua associação com outros fatores estressantes;

4. os efeitos das micotoxinas estão correlacionados a diversos outros fatores que podem se interrelacionar entre si:

a) ao animal:  espécie, raça, idade, porte, sexo;

b) ao ambiente habitado pelo animal: estresse ambiental relacionado à temperatura, umidade relativa, contaminação ambiental com outras substâncias tóxicas, etc.

c) à co-existência de outras doenças agudas ou crônicas;

d) ao tempo de exposição à micotoxina e se a exposição foi contínua ou intermitente; 

e) à concentração da micotoxina ou das micotoxinas ingeridas pelo animal;

f) ao estado geral de saúde em que se encontra o animal no momento da exposição à micotoxina.

Nos alimentos fornecidos aos ruminantes, seja forragem (verde, feno ou silagens) ou cereais, sempre haverá a presença de estruturas fúngicas em sua superfície ou na intimidade de seus tecidos vegetais. Conídios de diversos gêneros podem ser encontrados antes, durante e após a colheita e também durante o transporte e armazenagem. Os conídios, que são elementos de propagação dos fungos, se materão inertes enquanto certos fatores fisico-químicos como a atividade de água, temperatura, pH, oxigenação e outros, forem mantidos em níveis abaixo do ideal para a sua germinação e crescimento das hifas. Evidentemente que o controle desses fatores não tem como ser realizado igualmente se os animais forem mantidos em pastagens naturais ou alimentados de outras formas. 

 A bovinocultura, talvez seja a criação de animais em que se observa a maior variação nos modelos de alimentação dos animais. Ainda que o sistema predominante  de criação no Brasil seja o pastoreio em pastagens naturais ou cultivadas, gradativamente, novas formas de alimentação vêm sendo introduzidas. Silagens de matéria verde e concentrados de grãos foram introduzidos em processos de criação intensivos ou semi-intensivos, principalmente nas regiões mais desenvolvidas do país.   Dessa maneira, quando bovinos são alimentados com pastagens e suplementados com silagens ou com concentrados de grãos, além das micotoxinas típicas das pastagens, os animais também poderão ingerir, ao mesmo tempo, outras micotoxinas. Dessa maneira novas doenças irão se manifestar com sintomas e alterações patológicas provocados pela associação de duas ou até mesmo mais micotoxinas. Se, até o momento, pouco se sabe sobre as principais micotoxinas e seus efeitos sobre as diversas espécies animais, o que dizer, então, dessas possíveis associações. Com os novos modelos de criação, tornou-se possível a ocorrência de associações entre micotoxinas  como por exemplo: ergovalina com aflatoxinas; ergovalina com roquefortina; ergovalina com ochratoxina; patulina com lolitrem; patulina com aflatoxina e muitas outras combinações que eram impensáveis e improváveis até há bem pouco tempo.

Micotoxicoses agudas e crônicas 

Na dependência da quantidade ingerida e do tempo de exposição à micotoxina, os efeitos observados podem ser imperceptíveis ou muito graves. A intensidade dos efeitos também pode ser maior em uma espécie do que em outra e mesmo um indivíduo pode ser mais sensível do que outros da mesma espécie. O quadro clínico também pode ser complicado pela ocorrência concomitante de duas ou mais micotoxinas em um mesmo alimento.

As micotoxicoses agudas se caracterizam pelo desenvolvimento de severas alterações clínico-patológicas resultando, muitas vezes, na morte de animais. Mesmo assim, elas nāo sāo as manifestações mais importantes. Intoxicações agudas podem ser muito graves, mas elas nāo sāo as mais comuns. Para que elas surjam é necessário a ingestão de elevados níveis de micotoxina, o que não é frequente. Altas concentrações provocam lesões hepáticas e renais, hemorragias devido a coagulopatias e fragilidade capilar, redução da metabolização e absorção de alimentos.  

Na maioria das vezes, a ocorrência de micotoxinas nos diversos tipos de grãos é em baixas concentrações. Por esse motivo, as intoxicações crônicas são mais comuns e, por isso mesmo, mais importantes do que as agudas. Nas intoxicações crônicas, a ingestão repetitiva de níveis baixos de micotoxinas pode provocar redução no consumo de alimentos, menor produção de leite,  menor ganho de peso corporal, diarréias repetitivas.

Efeitos também de grande importância, mas pouco perceptíveis, são os imunossupressivos com redução da resistência às infecções e parasitoses, maior susceptibilidade ao estresse e reduçāo da fertilidade. Trata-se de um conjunto de sintomas e sinais clínicos inespecíficos que, por isso mesmo, devem ser considerados como indicativos de provável correlação com micotoxinas. 

MICOTOXICOSES EM ANIMAIS HERBÍVOROS

Na maioria absoluta das vezes em que se discute o tema Micotoxinas/Micotoxicoses, não se aborda outra coisa que não esteja relacionada com as micotoxinas encontradas em cereais e oleaginosas. Quase ninguém se preocupa com as micotoxinas de ocorrência no campo. Não há estudos sistemáticos comparativos ou estatísticos que demonstrem a importância das micotoxinas de campo para a economia pecuária. 

Parece certo e evidente que as micotoxinas produzidas em grãos sejam as mais comuns e, portanto, mais importantes do que as produzidas no campo.

 Mas, será mesmo que no caso dos ruminantes isto é verdadeiro? 

Se a maioria desses animais se alimentam na maior parte do tempo em pastagens e unicamente de plantas, sem qualquer suplementação, é de se supor que as micotoxinas encontradas em pastagens  tenham  importância superior à daquelas que são encontradas em rações.  É importante salientar que análises laboratoriais de rotina costumam ser feitas somente para a detecção de micotoxinas em grãos e quase nunca em forragens, por isso, não há dados estatísticos sobre a ocorrência de micotoxinas em pastagens. Forragens costumam ser avaliadas por seu aspecto e por seu odor, características que não têm qualquer correlação com a presença de micotoxinas. Se análises não são feitas, é claro que não pode haver muitas informações sobre micotoxinas em forragens. 

Quando mantidos  em pastagens, os ruminantes  podem ingerir micotoxinas que podem estar presentes na matéria verde, em palhas secas, fenos e silagens. 

Durante o crescimento das plantas forrageiras, pode-se observar o desenvolvimento de três grupos distintos de fungos que atuam sobre as diversas partes da planta, com marcantes influências sobre cada uma das etapas de seu ciclo biológico e, em cada um destes três grupos, há espécies produtoras de importantes micotoxinas:

1. fungos patogênicos para plantas; 

2. fungos endofíticos;   

3. fungos decompositores de plantas mortas.

Alcalóides do ergot

Alcalóides tóxicos, os alcalóides do ergot, podem ser produzidos em plantas forrageiras e em espigas de cereais, por dois grupos distintos de fungos:

a) espécies do gênero Claviceps; 

b) por fungos endofíticos, principalmente os do gênero Neotyphodium que são encontrados em gramíneas como o azevém e a festuca.

a) FUNGOS DO GÊNERO CLAVICEPS 

Entre cerca de 50 espécies classificadas no gênero Claviceps, as mais frequentemente associadas com patologias em animais são C. purpurea (parasita de gramíneas forrageiras e cereais), C. paspali (desenvolve-se em Paspalum), e C. africana ( encontrada no sorgo). O mais importante dos três fungos é o Claviceps purpurea, conhecido por ser produtor de alcalóides tóxicos quando ele se desenvolve  em sementes de centeio (mais comum) e de outros cereais e gramineas forrageiras.

Para conseguir infectar uma planta, as estruturas  de  reprodução assexuada (conídios) do C. purpurea necessita entrar em contato com o estigma por isso, o fungo infecta sobretudo plantas de flores abertas como o centeio, o trigo e a cevada. Ao serem transportados por insetos, os conídios serão depositados no ovário da planta, quando germinarão produzindo hifas que destroem o ovário da planta e se unem ao feixe vascular que era usado para alimentar as sementes. Nesta fase, forma-se o esfacélio que é uma estrutura mole e branca, rica em substâncias açucaradas e contendo milhões de conídios que serão levados por insetos para outras flores. Em seguida, os esfacélios transformam-se em esclerócios que são ricos em alcalóides. Os esclerócios são estruturas resistentes que podem permanecer viáveis   e dormentes por  vários meses no solo, até que as condições ambientais favoreçam sua germinação com a produção de estruturas parecidas com  micro cogumelos que, por sua vez, produzirão esporos em um processo de reprodução sexuada. Estes, ao serem ejetados, contaminarão plantas em floração. Quando os animais consomem essas plantas portadoras de esclerócios de Claviceps, observam-se os episódios de intoxicação conhecidos genericamente por ergotismo. Por sua forma ser parecida com o esporão do galo, o esclerócio é comumente designado por "esporão do centeio" por "ergot" que tem o mesmo significado em francês.

   

                               Esclerócio de Claviceps purpurea

b) FUNGOS ENDOFITICOS

São fungos que se desenvolvem nos espaços intercelulares dos tecidos de uma planta sem lhe causar danos e nenhum sintoma de doença pode ser observado. Trata-se de uma relação simbiótica em que o fungo obtém seus nutrientes dos componentes químicos da planta e consegue se perpetuar através de sua disseminação no meio ambiente por meio das sementes da planta hospedeira.  Em contrapartida, o vegetal se beneficia dessa relação ao se aproveitar de alcalóides produzidos pelo fungo para protegê-la do ataque de parasitas e dos rigores da seca. A  presença de um fungo endofítico no interior da planta significa, portanto, a introdução de um fator adicional de defesa para a planta que, em alguns casos, pode ser uma das diversas micotoxinas pertencentes ao grupo dos alcalóides.  

Quando comparadas com plantas não portadoras do fungo endofitico, as que mantêm o fungo em seus tecidos, demonstram não somente maior resistência aos insetos e nematóides, como também suportam melhor os períodos de maior estiagem. Nas plantas infectadas por endofíticos, observa-se também um aumento de tolerância ao pastoreio e um maior  desenvolvimento de massa vegetal, o que as torna mais indicadas para a utilização em pastagens. Esta seria uma associação ideal não fosse a constatação de que os fungos endofíticos são produtores de substâncias alcalóides tóxicas para os animais domésticos.   

                               Hifas do fungo endofítico Neotyphodium spp

                                                                  em tecido vegetal

Algumas espécies do gênero Neotyphodium estão entre os fungos endofíticos mais estudados dentre aqueles que vivem em associação simbiótica com plantas, em especial porque elas estão intimamente associadas com importantes plantas forrageiras como festuca ("tall fescue") e azevém ("perennial ryegrass"), amplamente utilizadas em pastagens para bovinos, ovinos e equinos. Neste contexto  tem recebido maior atenção duas espécies endofíticas incluidas no gênero Neotyphodium: 

1. Neotyphodium coenophialum que produz ergovalina em pastagens de festuca (Festuca arundinaceae); 

2. Neotiphodium lolii que é produtora de ergovalina e lolitrem B em azevém (Lollium perenne).

      

ERGOTISMO

Ergotismo é uma terminologia usada para designar as intoxicações associadas à ingestão de alcalóides encontrados no "esporão de centeio" que são estruturas reprodutivas produzidas pelo Claviceps purpurea em diversas gramineas.   Nos esclerócios encontra-se acetilcolina, histamina, tiramina, amidas do ácido lisérgico e diversos alcalóides tóxicos. Os alcalóides do ergot, quimicamente caracterizados pela presença de um núcleo tetracíclico ergolina em suas moléculas, se dividem em dois grupos distintos: 

1. alcalóides amínicos (ex.: ergonovina, metilergolina,); 

2. alcalóides peptídicos (ex.: ergotamina, ergocriptina, bromocriptina). 

Em cada animal, as características clínicas da intoxicação podem variar na dependência da concentração relativa dos componentes químicos dos esclerócios.

Ergotismo gangrenoso - O ergotismo gangrenoso corresponde à forma crônica da intoxicação. Os alcalóides do ergot, especialmente a ergotamina, provocam vasoconstrição periférica, acompanhada de tromboses provenientes de danos observados no endotélio vascular, o que resulta em redução do fluxo sanguíneo, especialmente nas extremidades. Quando a vasoconstrição se torna severa, podem ocorrer episódios de gangrena seca localizada nas patas, orelhas, barbelas e rabo. Em casos mais avançados, o casco pode se soltar completamente e pode, até mesmo, haver perda total da pata.   

                            Gangrena seca em bezerros intoxicados

                            com alcalóides do esporão do centeio

Ergotismo nervoso - No ergotismo nervoso, que pode ser considerado como a forma aguda da intoxicação, certos alcalóides como a bromocriptina atuam seletivamente sobre os receptores dopamínicos da hipófise.  aos primeiros sintomas são ptialismo, hiperexcitabilidade, tremores, incoordenação, vertigens e ataxia. Quando os  animais são provocados por estímulos auditivos ou visuais, costumam responder com excitação e até mesmo com agressividade. A esta fase, podem seguir períodos convulsivantes e morte. Quando mantidos isolados e em repouso, os sintomas tornam-se imperceptíveis.

Em pastagens de Paspalum dilatatum, forragem conhecida como paspalum ou paspalo, pode ocorrer uma intoxicação envolvendo o sistema nervoso central provocada pela ingestão dos alcalóides (paspalitrem A e B, paspalanina e ácido lisérgico) encontrados em esclerócios de Claviceps paspali. Trata-se de uma afecção neurológica muito parecida com a observada nas intoxicações por toxinas tremorgênicas. 

Desempenho produtivo -  Os alcalóides do ergot também podem interferir no desempenho produtivo dos animais ao provocar anorexia, quando se observa um menor consumo de alimentos ou sua recusa total, o que resulta em baixo ganho de peso corpóreo. Eles também podem provocar importantes quedas na produção de leite podendo chegar até mesmo à agalactia, em consequência da supressão da secreção de prolactina pelas células hipofisárias. 

Intolerância ao calor - Outra importante característica observada nas intoxicações por alcalóides do ergot, especialmente durante os períodos mais quentes, é uma pronunciada intolerância ao calor, quando os animais tipicamente, procuram se manter à sombra ou dentro de poças d'água, eles consomem menos alimentos, mostram-se deprimidos e com hipertermia.

MICOTOXINAS TREMORGÊNICAS

As micotoxinas tremorgênicas ou simplesmente tremórgenos, constituem um conjunto de substâncias quimicamente semelhantes, cuja estrutura molecular básica é um núcleo indol-terpeno. São neurotoxinas e podem ser divididas em três grupos de acordo com o número de átomos de nitrogênio presentes na molécula:

1. Molécula com um átomo de N (exemplos: paspalitrens, penitrens, jantitrens e lolitrens).

2. Molécula com três átomos de N (exemplos: fumitremorgina-verruculogens).

3. Molécula com quatro átomos de N (exemplos: triptoquivalinas).

 Os tremórgenos atuam sobre o sistema nervoso central provocando alterações neurológicas caracterizadas por tremores musculares, ataxia, vertigem, hipermetria,  aumento da base de sustentação, hiperexcitabilidade, incoordenação motora, convulsões e dificuldades para se levantarem após frequentes quedas. Ao cair, o animal pode permanecer com os membros estendidos e apresentar graves luxações articulares. Quando incitados a se moverem, os sintomas se exacerbam e as quedas se multiplicam no plantel afetado. Mortes são incomuns. Talvez porque nas micotoxicoses tremorgênicas os sintomas  sejam facilmente perceptiveis, elas são as micotoxicoses diagnosticadas com maior frequência em ruminantes. 

Fungos produtores - As micotoxinas tremorgênicas são produtos do metabolismo secundártio de diversas espécies de fungos exofíticos e endofíticos. Atualmente são conhecidas mais de 30 substâncias tremorgênicas produzidas principalmente por espécies pertencentes aos gêneros Claviceps, Aspergillus, Penicillium  e Neotyphodium (Acremonium) e Balansia.

Micotoxina	Fungos produtores
Aflatrem
Penitrem A	Penicillium nigricans  Penicillium antitellum  Penicillium cyclopium  Penicillium clavigerum  Aspergillus canescens
Fumitremorgina B	Penicillium estinogenum
Verruculogem	Penicillium estinogenum  Aspergillus fumigatus
Triptoquivalona, Nortriptoquivalona Triptoquivalina  Gliantripina	Aspergillus clavatus

Micotoxicoses em forrageiras com fungos endofíticos

FESTUCA - A gramínea conhecida com o nome de festuca "tall festucae" (Festuca arundinaceae) é amplamente utilizada em várias partes do mundo para a formação de pastagens para a criação de bovinos, ovinos e outros animais herbívoros. A planta em si, não apresenta qualquer grau de toxicidade para qualquer espécie de animal, entretanto, episódios de intoxicação passam a ocorrer quando suas estruturas são invadidas pelo fungo endofitico Neotiphodium coenophialum que é produtor de alguns dos alcalóides que também são sintetizados pelo Claviceps purpurea. O mais importante deles é a Ergovalina, que é uma micotoxina responsável por alterações nas extremidades dos membros, alterações que são conhecidas como pé de festuca ("fescue foot"); doença do verão e problemas reprodutivos, conhecidos coletivamente como Fescue toxicoses, que é considerada nos Estados Unidos como a principal intoxicação induzida pelo consumo de forragens.

- Pé de festuca ("fescue foot"), uma das manifestações da festuca toxicoses caracteriza-se por edema ao redor do boleto e na região do casco, gangrena seca das extremidades da orelha e da cauda. Nos casos mais avançados, pode ocorrer perda do casco. Estes sinais clínicos são semelhantes aos observados nas intoxicações por alcalóides produzidos por Claviceps purpurea e são decorrentes da ação da ergovalina sobre os vasos sanguineos resultando em redução do fluxo sanguíneo e a formação de coágulos. 

Além dessas manifestações, em bovinos podem ser observadas várias outras alterações clínicas:

- Apetite reduzido ou reduzido consumo de alimentos, tendo como consequência, a redução de ganho de peso em animais jovens em crescimento e perda de peso em animais adultos.  Observa-se, também, redução na produção de leite, inflamação intestinal e diarréia em alguns animais. 

- Hipertermia de verão ou doença de verão - Além das manifestações principais, há um conjunto de problemas relacionados a essa forragem, referidas coletivamente como doença de verão:  os alcalóides do ergot são responsáveis por um quadro de hipertermia não infecciosa quando se observa aumento da temperatura corporal em alguns animais. isto se deve à vasoconstrição periférica provocada pelo alcalóide que reduz a capacidade do animal manter a temperatura corporal dentro da normalidade.

- Liponecrose (lipomatose) - Alterações  que são observadas nas gorduras localizadas na região abdominal.

AZEVÉM - Em pastagens formadas com azevém "perennial ryegrass" (Lollium perenne), bovinos, ovinos, equinos e outros herbívoros podem se contaminar com as micotoxinas ergovalina e lolitrem B, quando esta gramínea mantém uma relação mutualística com o fungo endofítico Neotiphodium lolii. Com a ingestão da ergovalina que está presente no azevém em menores concentrações do que na festuca, os animais desenvolvem sintomas semelhantes aos descritos nas intoxicações por festuca porém, eles se manifestam de forma mais branda. Em contrapartida, por causa da presença do lolitrem B, uma das principais micotoxinas tremorgênicas, desenvolve-se sinais clínicos caracterizados por alterações neurológicas com tremores musculares, ataxia, vertigem, hipermetria, aumento da base de sustentação, hiperexcitabilidade, incoordenação motora, convulsões e dificuldades para se levantarem após frequentes quedas, conforme já descritos anteriormente. Trata-se de uma síndrome conhecida por "ryegrass staggers" vertigem do azevém ou cambaleio.